分光荧光计(也称为荧光/光致发光光谱仪)

分光荧光计用于测量样品的荧光发射(或更一般地说,是光致发光)。光谱荧光计和荧光/光致发光光谱仪是可以互换的,不同的制造商以不同的名称来称呼它们。通常的约定是,分光荧光计是指尺寸类似于分光光度计的紧凑型台式仪器,例如FS5分光荧光计,而术语“荧光/光致发光光谱仪”用于性能更佳,功能更多样化的大型光谱仪。

典型的稳态分光荧光计的布局如图8所示。分光荧光计的激发侧与分光光度计等效:白光源和激发单色仪。氙弧灯被用作光源,因为它们的高亮度对于测量微弱的荧光发射至关重要。样品被选定的激发波长照射,从而使其发出荧光。荧光发射是由发射单色仪收集的,该发射单色仪与激发单色仪成90度定向,选定的波长到达检测器。通常是光电倍增管。

在分光荧光计中进行的两个**常见的光谱测量是激发光谱和发射光谱。为了测量激发光谱,将发射单色仪设置在强荧光发射的波长处,在感兴趣的波长范围内扫描激发单色仪,并在检测器上监测荧光强度的变化(图9蓝色曲线),从而揭示吸收特征样本。发射光谱与此相反。设置激发单色仪的波长,使样品具有较强的吸收能力,将发射单色仪扫过感兴趣的波长区域,并检测到的荧光变化(图9红色曲线)揭示了样品的荧光特征。