使用OneDrop微取样盘进行CD光谱测量

介绍

随着NMR和X射线晶体学，CD光谱学是蛋白质结构分析不可或缺的测量方法。由于小体积和/或低浓度是CD样品测量的典型要求，因此JASCO开发了一种新型取样技术以满足这些样品要求。

该技术使用单滴微取样盘（MSD），如图1所示。使用One-Drop MSD的CD测量具有以下优点：

1. 小体积要求：10μL（1 mm路径长度），2μL（0.2 mm路径长度）
2. 易于处理的MSD：透镜的疏水处理保持样品在盘中心
3. 可变路径长度：可用于1或0.2 mm路径长度的间隔物
4. MSD窗口提供无伪影测量
5. JASCO CD光谱仪使用平行光束，因此不需要对准
6. 高度可重复的基线

本应用笔记将通过测量四种蛋白质的CD光谱来证明一滴微量取样盘的容易性和效率。

图1.微量取样盘组件（可拆卸单元，2个窗口和间隔件）

实验

为了使用图1所示的微量取样盘，将样品滴到MSD的中心部分。然后将盘组装并夹紧。然后将MSD置于样品架中的垂直位置。

图2.使用微量取样盘的程序图

结果

图3所示的CD光谱比较了使用MSD和常规电池获得的结果。与使用的圆柱形电池（蓝线）相比，微取样盘（绿线）提供近似相同的光谱。数据还显示在260和190nm之间的二级结构可以使用MSD在少于三分钟内测量。

图3.使用微量取样盘（蓝色）和圆柱形细胞（绿色）的（A）血红蛋白，（B）溶菌酶，（C）刀豆蛋白A和（D）胰蛋白酶抑制剂的CD光谱。

结论

本应用笔记表明，单滴微量取样盘是一种易于使用的方法，可为小体积和低浓度样品获得可靠且快速的结果。