如何检查泵系统的HPLC分析精度

泵系统的精度为用于进行设备**高效液相色谱(HPLC)在制药和其他工业受到FDA和类似部门管理监督的分析。 在HPLC执行的功能中包括纯度检查,在化学合成放大,稳定性和溶出度测试期间监测药物中间体的变化,以及执行持续的质量控制程序。

HPLC分析简介

通过HPLC鉴定分析物是基于当分析物泵送通过HPLC系统时的**和可重复的柱保留时间。 可重复的保留时间**关重要,取决于**,均匀,可重现的HPLC泵流速。

注意,区分精度和精度很重要。 这两个术语可能看起来相同,但它们不一定如此。 例如,HPLC系统(或者对于许多其它系统,例如分析秤)可以**地测试。 这意味着他们总是提供相同的结果。 但结果可能不准确,这意味着它们是**不准确的。

那么,怎么会出现问题呢? 那么,HPLC系统中的泄漏或其他故障将导致分析错误。 这意味着应定期检查HPLC系统,以确保泵流量正确校准。 这是操作资格的一部分。 OQ在HPLC系统投入使用之前开始,并作为正在进行的系统校准检查的一部分继续进行。

HPLC故障排除

HPLC泵故障是不正确读数的常见原因。 通过定期更换活塞密封等定期维护,可以减少泵故障的发生。 另一个重要的程序是在HPLC系统的常规性能验证期间检查泵流量精度。

有两种方法来检查泵流量精度。 一种是手动方式; 另一个是容易的方法。

手动检查HPLC泵流量精度是体积法。 它需要耐心,锋利的视力,一个秒表和一个精细量筒。

技术人员开始在量筒中收集HPLC洗脱液,并同时启动手表。 当收集到足够的体积时,技术人员同时停止进入气缸的流动并停止手表。 然后技术人员计算并记录以毫升/分钟计的流速。

**进行若干测量以计算标准偏差。 这种重复过程解释了手动HPLC泵流量分析的劳动强度。

简单的方法来实现流量测量是使用一个液体流量计例如可从Tovatech的流量标定5000便携单元。

数字液体流量计的工作原理

小巧,轻便的流量标定5000数字液体流量计由操作重复的时间**测量它需要溶剂来一补140微升流管。 当溶剂填充管时,弯液面通过两个光学传感器。 这些传感器与内部计时器连接以监测弯液面的渡越时间。

否则,当液体在底部进入流量计并开始填充测量管时,弯液面通过底部传感器。 这将激活计时器。 当弯液面到达顶部时,其激活打开阀门并排空管的第二传​​感器。

然后阀关闭,过程重复。 新测量更新仪器的4位液晶显示屏上的读数,数据通过RS-232接口传输到热敏打印机或计算机进行6位(xx.xxxx)读数。

检测管的小体积使流速**到50μL/ min,测量的流速与液体粘度无关,为10厘泊。 一致的读数表明HPLC泵运行正常。 方差信号泄漏或需要注意的其他故障。

其他FlowCal 5000特性

可用任何HPLC系统的单位都配备了一个单片机,并以1.0毫升/分钟供货重量分析校准。 多点校准可用,因为设备保证线性从0.05到25ml /分钟**到1%的读数。 它们带有安装套件,清洁套件和UKAS(等效于NIST)可追溯校准证书,说明显示的流量在每个校准点的实际流量的±1%之内。 包括操作说明在内的一切都包装在手提箱中。

证书上记录的校准点来自广泛的过程,旨在通过取例如以0.5ml / min的30+读数,以1.0ml / min的40+读数和以5.0ml / min的约100读数来获得统计上准确的数据。 通过RS 232接口捕获和平均数据到PC。 证书显示每个流量下这些读数的平均值,并调用显示的流量。 此外,证书显示百分比误差和百分比标准偏差。

数字流量计重新校准过程

根据GLP(良好的实验室规范)和符合其他规定,数字液体流量计应该每年重新校准,或者如果显示单元不能正常工作。

需要通过认证的测试设备来重新校准流量计,以便发出新的校准证书。 这不是一个简单的过程,需要恒定流速的水源。 如果需要,调整需要访问用户不可用的固件。

更实际的做法是返回流量标定5000流量计Tovatech用于校准 ,这个过程大约需要14天。 返回的单位附有如上所述的校准证书,并详细说明程序的结果。 以下是重新校准过程的简要说明:

**先用水冲洗流量计。 然后以1.0ml / min读取“发现”(或“之前”)读数,以测量接收状态下流量计的精度。

客户可要求校准证书在所有校准点显示“之前”数据,而不是以1.0 ml / min。

然后清洁流管,检查传感器,进行任何维修和必要的调整,以使流量计达到规格。 然后流量计校准到所有客户的所需流速。 “后”数据记录在校准证书上。 这确认返回的流量计根据规格执行。

如何维护数字液体流量计

不正确的使用可能会导致测量不准确。 这里有一些维护仪器的提示。

  • 不要在流量计中立即引入两种不混溶的液体,而不允许**液体蒸发或引入第三溶剂,其中其它两种溶剂是可混溶的。
  • 保持不良的感测管可能在管中捕获气泡并产生高读数。 如果观察到气泡,关闭设备,让管排出2秒钟。 重新启动流量计,并重新装满。
  • 如果流量计放置储存一周或更长时间,应用乙醇冲洗以防止藻类生长。

FlowCal 5000米在不断使用应该每两周清洁一次操作,通常需要约15分钟。

所提供的清洁套件和说明用于此重要功能。 它不需要拆卸感测管,这将使工厂校准无效。 清洁是一个简单和直接的过程:

  • 断开连接到垂直安装的流量计底部入口管的管道
  • 打开设备电源。
  • 在从流量计顶部伸出的流量管周围缠绕一个小的薄纸或干净的布。 这将防止清洗液通过附近的电源和RS-232插座进入流量计。
  • 检查清洁刷,确保其清洁,无松动的刷毛或纤维
  • 将其浸入清洁液中,将其小心地插入流管中并向下推,直到感觉到阻力。
  • 轻轻旋转刷子,同时在管中上下移动,收集组织中的任何泡沫。

取出刷子后,用干净的温水填充随附的20 ml注射器,并连接提供的钝端Luer针。 将小口径管连接到钝端针,然后小心地将管道20 mm推入流量管的顶部,并缓慢注入温水。 水将通过流管并从仪器底部的溢流管流出。 的流量标定5000流量计可能报告“错误2”或“错误4”和阀可能会听到操作期间通过排水出口打开和排水。 这个是正常的。

用温水重新注满注射器并重复此步骤。

以下步骤应重复两次,以确保所有清洗液已从流量计中冲洗,并且传感器头已冷却**室温:

  • 填用干净冷水注射器并在流量计的底部连接到入口管。
  • 将手指放在流量计顶部的流量管顶部。
  • 慢慢注入冷水。 水将流过流管并从底部的溢流和排水出口流出。 可能发生错误读数和阀门打开和关闭,同样可以忽略。
  • 清除任何溢出物; 将FlowCal 5000流量计重新连接到泵和洗脱液等。在进行读数之前,让淋洗液流动几分钟以冲洗掉任何水。

FlowCal 5000现场经验

用户已经观察到了优点。 一家制药工业服务供应商的工程师表示,他熟悉重量法和所有的挑战。 他说,FlowCal 5000流量分析可以在不到5分钟内完成,包括用于记录保存的所有重要数据输出。 他说,这比重量法节省了15到20分钟的时间。

一家制药公司的计量技术员评论说,FlowCal 5000的一个主要优点是不需要使用耗时的刻度汽缸和停止观察方法来监测流量。 其他优点包括易于使用,高精度读数和节省时间。